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PAL酶活性测定方法

作者:i236    来源:i236.com

称取一定量植物材料,加入2倍体积的0.1 mol/L,pH 8.8硼酸缓冲液(含15 mmol/L巯基乙醇)和50 mg PVP,冰浴中匀浆,12000 rpm离心15min,取上清液。反应液为:1.6 mL 0.1 mol/L-1硼酸缓冲液(pH8.8,内含10 mmol•L-1苯丙氨酸)加0.2 mL酶液, 37℃反应1 h后,加入0.2 mL 6 mol•L-1 HCl终止反应,测290nm处的吸光值,以反应时间零作参比。A290变化0.01为一个酶活单位(U•h-1•g-1•mf)。

注意:不同的实验目的和实验材料会导致实验方法不同,本资料仅供参考。在PAL活性测定实验中,硼酸缓冲液的浓度,PVP的加入量,苯丙氨酸浓度有时需要调整。

参考资料Yong Wang,Jian-Ye Chen,et.al., Cloning and expression analysis of phenylalanine ammonia-lyase in relation to chilling tolerance in harvested banana fruit.Postharvest Biology and Technology 44 (2007) 34–41


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