1.紫外灯下切下含待回收DNA的胶条(尽量使体积较小),将切下的胶条(小于0.6g)捣碎,置于1.5ml离心管中;
2.加入等体积的Tris-HCl饱和酚(pH 7.6),振荡混匀;
3.-20℃放置5-10min;
4.4℃离心10000g×5min,上层液转移置另一离心管中;
5.加入1/4体积H2O于含胶的离心管中,振荡混匀;
6.-20℃,放置5-10min;
7.4℃离心10000g×5min,合并上清液;
8.用等体积酚/氯仿、氯仿分别抽提一次,取上清;
9.加入1/10体积3M NaAc(pH 5.2)、2.5倍体积预冷的无水乙醇,混匀;
10.-20℃,静置30min;
11.4℃离心13000g×10min,弃上清,75%乙醇洗沉淀1-2次,晾干;
12.加适量H2O或TE溶解沉淀。