关键词：酵母；形态观察；美蓝；

实验原理

    酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比细菌大几十倍甚至十几倍。大多数以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验是通过美蓝染液水浸片和水—碘液水浸片来观察酵母的形态和出芽生殖方式。

    美蓝是一种无毒的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色，借此即可对酵母菌的死活细胞进行鉴别。

材料与器材

菌种：酵母。

培养基和试剂：麦芽汗琼脂培养基，0.05％ 和0.1 吕氏碱性美蓝染色液，革兰氏染色用碘液.显微镜，玻片等。

步骤

1、菌种活化

将酵母移种至新鲜的麦芽汁琼脂斜面上，25~28℃培养48 h左右备用。

2、美蓝镜片的观察

1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。

2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。

3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。

4）染色约0.5h后再次进行观察，注意死活细胞数量是否增加。