取样
1、来源：土壤中放线菌最丰富，品种齐全。可以筛选新的放线菌。
从堆肥或过热的材料中如干草或蔗渣中可分离到大量的嗜热放线菌，从淡水和海

洋环境中分离到嗜碱性的和嗜酸性的菌种。
2、预处理
（1）土样：取5cm以下的土样，放于灭菌过的牛皮纸袋中，一般不放于不透气的

瓶子或塑料袋中。气生孢子能耐干燥，耐湿热能力高于营养体，室温保存20天，

放线菌的数量和组成变化不大，细菌大部分死亡。
（2）水样与水低泥样用采泥器和采水器采集，放与灭菌瓶，不密封。
分离
（1）取体积为300ml的高氏一号培养基，加入0.1%的重铬酸钾15mL，使之终浓度

为50ppm，摇匀，倒平板，待用。
（2）取土样5g，摊平于大号培养皿上，在恒温干燥箱中120℃干热处理1h。
（3）土样热处理后，加入装有45mL无菌水和少量玻璃珠的三角瓶中，加入0.5mL

的笨酚，室温下振荡30分钟，静止5分钟，取上清液用无菌水稀释10倍。同时另取

土样5g，不加热和笨酚处理，余步骤同上，作为对照。
（4）用移液管分别吸取原液和10倍稀释液各0.1ml标志稀释倍数的平板上，涂抹

均匀，倒置，28℃培养。
（5）培养10-14d，观察比较不同处理方法的生长情况、菌落特征。挑取红色，无

气生菌丝的小菌落以及其它菌落形态菌株接种斜面，进一步用于形态观察和鉴定

。