1.目的要求

（1）了解热杀索丝菌对肉及肉制品的危害。

（2）熟悉肉及肉制品中热杀索丝菌的检测方法。

2. 基本原理

索丝菌（Brochothrix）为G^＋杆菌，最适生长温度20～25℃，兼性厌氧。包括热杀索丝菌(B. thermosphacta)和野油菜索丝菌(B. compestris)两个种。野油菜索丝菌来源于土壤和草，而热杀索丝菌是肉与肉制品，特别是真空包装的冷鲜肉中常见的腐败菌。因此，用索丝菌的选择性培养基就能把热杀索丝菌从肉及肉制品中分离出来。

STAA是分离热杀索丝菌常用的良好的选择性培养基，22℃，培养5天后，在其上面生长的大部分菌落为热杀索丝菌，只有极少数为假单胞菌。通过革兰氏染色就很容易将二者区分开来。

3.实验材料

3．1样品  真空包装的冷却鲜肉。

3．2 培养基  225mL 0.1%无菌蛋白胨水1瓶，9mL 0.1%无菌蛋白胨水，STAA培养基1瓶。

3．3 仪器  恒温培养箱，1mL无菌吸管，灭菌的剪刀，灭菌均质器，无菌培养皿。

4 实验方法与步骤

4．1 取样

无菌条件下取真空包装的冷鲜肉表层25g，用无菌剪刀剪碎，放入225mL 0.1%无菌蛋白胨水中，均质（8000-10000/min，1min），制成10^-1的均匀样品稀释液。

4．2 稀释

用1mL的无菌吸管吸1mL 10^-1的均匀样品稀释液于9mL 0.1%无菌蛋白胨水中，混匀，即成10^-2的样品稀释液。根据需要依次做10倍的稀释。一般未腐败的冷鲜肉中热杀索丝菌不会超过10³CFU/g。

4．3 培养

吸取适宜稀释度的样品稀释液1mL（一般做2～3个稀释度）于无菌培养皿内，倒入融化并冷却至45～50℃的STAA培养基（约15mL），摇匀，待培养基凝固后倒置放入培养箱中22℃，培养5d。热杀索丝菌的菌落通常在48h可见。

5. 实验结果

描述真空包装冷却肉中检测到的热杀索丝菌的特点特性。

6. 注意事项

在STAA培养基上除热杀索丝菌主要生长外，有时也会有少量假单孢菌的生长，而热杀索丝菌进行革兰氏染色时，偶而也会出现阴性，故应加以区别。