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酪蛋白的制备

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一、原理
牛奶含有半乳糖、蛋白质、脂肪成份。蛋白质中的酪蛋白通过等电点沉淀,再通过离心而获得,糖类小分子由于处于清液中而分离,沉淀物中所含的脂肪通过有机溶剂抽提而去除,最终得到纯白色、晶状酪蛋白。
二、试剂与器材

试剂:0.2 mol/L HAc-Na buffer、95%乙醇、乙醚
器材:离心机、水浴锅、pH计

三、

1.量取10mL牛奶于40 °C预热5min,然后加入10mL 经40°C预热的醋酸buffer,调pH值为4.7,冷却至室温;
2.室温下5000 rpm离心5min,弃去上清,用4mL ddH2O悬浮沉淀,然后5000 rpm离心5min;
3.用20mL 乙醇悬浮沉淀(振摇5min)以除去脂肪,过滤,过滤得到的沉淀用20mL乙醇洗涤,滤干后再用20mL乙醇乙醚混合液(1:1)洗涤沉淀,最后用20mL乙醚洗涤;
4.待乙醚会发完毕后于60°C下烘干。
5.沉重,计算。
产率=酪蛋白质量(g)/10mL *100%


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