1、电泳过程中溴酚蓝迁移至足够距离时（目的片段已能明显区分出来），在长波紫外灯下观察，用清洗过的刀片在目的片段前切下与目的片段同长，宽度适当（一般2 cm左右）的胶块。

注意：

①不要忘记在胶下垫一个新的塑料手套防止污染。

②小心不要将回收胶切裂，同时注意与目的带相邻的切面要尽量平整。

2、将切好的回收胶块放在回收胶槽内，在切去胶块处加入低熔点琼脂糖胶，待其凝固后将其小心放回电泳槽继续进行电泳。小心低熔点琼脂糖凝胶块与原回收胶块的交界面易断裂。

3、待目的带完全进入低熔点琼脂糖胶后，在长波紫外灯下用清洗过的刀片切下含有所需DNA带的凝胶条，置于新的灭菌的1.5 mL Eppendorf管中，加300 µL TE。

4、65℃水浴10 min或更长使胶块完全融化。

5、立即加入等体积（300~350 µL）Tris-Cl饱和酚（pH 8.0），摇晃混匀。

6、12000 rpm离心5 min。

7、小心将水相移到另一1.5 mL Eppendorf管中，加入2.5-3倍体积（780 µL即可）预冷无水乙醇。注意不要吸入下层杂质及酚相，没把握时宁可放弃一些上层水相。

8、12000 rpm离心5 min。

9、小心将水相移到另一1.5 mL Eppendorf管中，加入2.5-3倍体积（780 µL即可）预冷无水乙醇。注意不要吸入下层杂质及酚相，没把握时宁可放弃一些上层水相

10、置液氮3 min，取出后可置于－20℃放几min。小心防止管子爆裂。

11、12000 rpm离心10 min。

12、迅速弃上清，一般在管底会有针尖大小的沉淀物，小心用无水乙醇清洗后置于恒温器上干燥（55℃）5~10 min至无乙醇气味，再加入20 µL ddH2O溶解。

13、取20 µL电泳定量后－20℃储存备用。